Descrição: Podemos agrupar as técnicas histológicas de acordo com o tipo de corte. Assim, temos a técnica de corte por congelação e a técnica de corte por inclusão. A primeira destina-se a preparações temporárias e a segunda técnica aplica-se para obter preparações permanentes.

Para se obterem boas preparações definitivas, há necessidade de sujeitar o material a uma série de procedimentos que preservem o melhor possível as características estruturais e químicas das células vivas.

Os procedimentos para obtenção de preparações permanentes são:

1- Colheita

2- Corte

3- Fixação

4- Desidratação

5- Descalcificação

6- Inclusão

7- Microtomia

8- Coloração

9- Selagem

10- Observação ao microscópio.

A nossa demostração irá focar-se na microtomia (realização da "ténia" e fixação em lâmina), coloração e observação microscópica.

O corante utilizado será Eosina e Hematoxilina (corantes mais utilizados em histologia)

Existem vários tipos de corantes sendo os químicos, os mais complexos, pois envolvem

ligações covalentes, iónicas, pontes de hidrogénio entre outras.

A molécula do corante tem dois grupos essenciais, o cromógeno e o auxocromo (liga-se ao substrato conferindo natureza ácida, ou básica ao corante). Quanto maior o número de cromóforos mais intensa será a cor.

Auxocromos básicos

-NH3+ (anina primária)

-NH2+ (amina secundária)

- NH+ (amina terciária)

- N+ (amina quaternária)

Conferem cor aos substratos ácidos

Os auxocromos ácidos

- sulfúricos

-Carboxílico

- Fenólicos

Conferem aos substratos básicos cor.

 A Hematoxilina possui auxocromo básico ou catiónico, que se liga ao substrato ácido (ácidos nucleicos e núcleos)

 A Eosina possui auxocromo ácido ou aniónico que se liga a proteínas do citoplasma ou á matriz extracelular.

A hematoxilina não é um corante, mas a sua oxidação juntamente com um mordente confere-lhe as propriedades de um corante. O banho em água corrente faz mudar a cor de vermelho para azul ou arroxeado.

Como resultado teremos núcleos azuis e citoplasmas rosados

Focaremos algumas alterações histológicas em caso de tumores malignos.